一种地衣芽孢杆菌β-甘露聚糖酶突变体及应用

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成果名称: 一种地衣芽孢杆菌β-甘露聚糖酶突变体及应用 关键字: 应用行业: 医药制造业
高新技术领域: 生物、医药和医疗器械技术 所在地: 河北省 知识产权类型: 发明专利
知识产权编号: ZL202011368793.4 成果体现形式: 发明专利 成果属性:
成果所处阶段: 成果水平: 国内先进 研究形式:
学科分类: 战略新兴产业: 请选择... 课题来源:
第一完成单位名称: 河北科技大学 第一完成单位属性: 技术成熟度:
合作方式: 专利许可 交易价格(万): 5.00 所属十强产业:

本发明选用地衣芽孢杆菌β‑甘露聚糖酶基因,通过易错PCR对该基因进行突变,通过在枯草芽孢杆菌中进行高效分泌表达,筛选得到一个酶活性及pH稳定性提高的突变体。结果表明,β‑甘露聚糖酶及其突变体的最适温度60℃,最适pH 6.0,发酵4天时突变体酶活性达13888±260 U/mL,是野生型的2.2倍,且70℃半衰期为30 min,另外,β‑甘露聚糖酶突变体较野生型具更高的pH稳定性,在pH5.0~10.0范围内37℃保温1h后,残余酶活性均高于80%。该酶在养殖业中展现了良好的应用前景。

本发明涉及一种地衣芽孢杆菌β‑甘露聚糖酶突变体及应用。

本发明利用随机诱变PCR,对地衣芽孢杆菌β‑甘露聚糖酶基因进行随机突变,筛选酶学性质改善的β‑甘露聚糖酶突变体,并利用枯草芽孢杆菌实现了其高效分泌表达,为该酶在养殖业及食品等行业中的应用奠定了基础。

β‑甘露聚糖酶(EC 3.2.1.78)能够随机水解甘露聚糖的β‑1,4‑甘露糖苷键,产生低分子量的甘露寡糖,在饲料、食品、医药、造纸、纺织等行业方面具广泛应用价值。β‑甘露聚糖酶能够降低甘露聚糖的抗营养因子作用,提高家畜饲料的利用价值;另一方面,其降解产物甘露寡糖,能够促进乳酸菌和双歧杆菌的生长,利于动物肠道健康,还具有增强动物免疫、调节糖脂代谢、促生长和抗氧化等作用。

β‑甘露聚糖酶广泛存在于植物、动物和微生物中,但天然来源的酶产量低,难于满足生产需求。来源于地衣芽孢杆菌β‑甘露聚糖酶,具有良好的热稳定性和碱稳定性,在饲料、食品、造纸等行业都具有潜在应用价值,但该酶在地衣芽孢杆菌产量低,难于满足市场需求。
 2020年,饲料端全面限抗,β‑甘露聚糖酶因其具有抗营养因子及其水解产物利于动物肠道健康,是很有前途的替抗产品,市场需求量将进一步增加。β‑甘露聚糖酶在工业化应用过程中,部分领域需要高温处理,如动物饲料制粒过程中需85 ℃处理约3 min,由于大部分β‑甘露聚糖酶的最适温度为 40 75 ℃,高温下酶活性大大降低甚至完全失活;另外,~动物胃液呈酸性,而有的酶在酸性环境下酶活性也大大降低,因此,筛选耐酸性或pH稳定性高及热稳定性高的β‑甘露聚糖酶是目前急需解决的问题。


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